水质要求：仅可使用 2 级 / 2 + 级去离子水或 3 级蒸馏水，严禁使用超纯水和自来水。藻类、颗粒物等污染物会改变超声波传播路径，导致片段分布不均，需至少每月更换一次水浴用水，并用软纸巾清洁槽体内壁，禁止使用硬质清洁工具擦拭超声发射面。
水温控制：超声处理的最佳水温为 4℃，样本温度不得超过 10℃。水温超过 8℃时，超声效率会显著下降，且可能导致生物样本热变性。需搭配原厂冷水机与单循环阀维持温度，冷水机必须安装在超声主机下方，保证水流循环正常；单循环阀可确保仅在超声关闭阶段更换水体，避免水流干扰超声过程。
单次超声总开启时长不得超过 30 分钟，超声关闭循环时长需设置为大于或等于开启循环时长，最小关闭时长为 30 秒。
两次独立运行之间，必须让仪器冷却至少 15 分钟，避免超声发射器过热损坏。
无论使用何种规格的管架，必须始终装满离心管，空位需装入等体积纯水的离心管补齐，否则会导致能量分布不均，出现样本破碎效果差异大的问题。
| 实验类型 | 输出强度 | 标准循环参数 | 核心调整依据 |
|---|---|---|---|
| DNA 剪切 | 低功率（L 档） | 30 秒开启 / 90 秒关闭（常规片段）；30 秒开启 / 30 秒关闭（150bp 小片段） | 目标片段大小：片段越小，所需循环数越多（如 200bp 需 30 个循环，750bp 需 3 个循环） |
| 染色质剪切 | 高功率（H 档） | 30 秒开启 / 30 秒关闭，总循环数 10-30 个 | 细胞类型与交联程度：过度交联的样本需适当增加循环数，每 10 个循环需短暂涡旋离心样本 |
| 细菌细胞破碎 | 高功率（H 档） | 30 秒开启 / 30 秒关闭，总超声时长 10 分钟 | 细菌菌株：革兰氏阳性菌细胞壁较厚，可适当延长处理时间；对数生长期细胞破碎效率高于稳定期 |
DNA 剪切实验：仅推荐使用 0.5ml Bioruptor 专用 DNA 剪切微量离心管（货号：C30010013），搭配 0.5ml 离心管架（货号：B01200043）。
染色质剪切实验：推荐使用 1.5ml TPX 微量离心管（货号：C30010010），其超声传导效率优于普通聚丙烯离心管。
大体积样本处理：10ml、15ml、50ml 离心管需使用带金属反射棒的专用管架，金属棒通过共振系统反射超声波，提升大体积样本的处理效率。
浓度与体积控制：DNA 样本推荐浓度为 1-20ng/μl，最佳浓度为 10ng/μl，样本体积为 100μl；染色质样本每 300μl 裂解液中细胞数控制在 1×10^6-3×10^6 个；细菌样本重悬至 OD600=3.0，1.5ml 离心管中样本体积不超过 300μl。
样本预冷与混匀：超声前需将样本置于冰上预冷 10-15 分钟，充分涡旋震荡并短暂离心，将样本收集至管底。高粘度样本需多次吹吸混匀，避免局部浓度过高导致剪切不均。
样本质量把控：DNA 样本需保证 OD260/280 比值在 1.8-2.0 之间，去除 RNA、蛋白等污染物；染色质样本需控制交联时间在 8-10 分钟，使用甘氨酸终止交联反应，并用预冷 PBS 充分洗涤。
每次实验结束后，排空水浴槽中的水，擦干槽体内壁，避免滋生藻类或产生水垢。
每月检查超声发射器表面是否有划痕或腐蚀，检查电动盖子的齿轮盘转动是否顺畅，避免电机过载。
每 20 次高压灭菌后，检查大体积管架的 O 型圈是否老化变形，及时更换损坏的 O 型圈。
定期使用原厂 DNA 质控试剂盒对系统进行性能验证，通过检测 DNA 片段大小的变异系数评估超声效率。
过热停机：若仪器提示温度过高无法启动或运行中自动停机，需立即停止操作，延长冷却间隔至 30 分钟以上，可向水浴槽中加入碎冰辅助降温，同时检查冷水机运行状态和室温是否符合要求。
剪切效果不均一：优先检查管架是否装满、离心管是否正确安装，其次检查水浴水质和水温，最后验证样本浓度和离心管品牌是否符合要求。
超声效率下降：可能是超声发射器老化或水浴槽污染导致，需清洁水浴槽并更换新的去离子水，若问题仍未解决，联系授权服务中心进行检测。
固定离心管品牌和型号，更换耗材前需重新优化实验参数。
所有实验保持相同的水浴温度、超声强度和循环参数，避免随意调整。
对于新的样本类型，先进行时间梯度预实验，确定最佳处理条件后再进行正式实验。
采用统一的样本检测方法，使用新鲜配制的 1% 琼脂糖凝胶进行电泳检测，上样量不超过 5μg，样本提前用 RNase 处理，避免干扰检测结果。
2026-05-30
2026-05-18
2026-05-12
2026-05-09
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